快速質(zhì)粒提取試劑盒設(shè)計(jì)用于從1-5ml細(xì)菌培養(yǎng)物中快速分離質(zhì)粒或cosmid質(zhì)粒DNA。 改良的堿裂解法和RNase處理被用于制備具有小基因組DNA和RNA污染物的澄清細(xì)胞裂解液。在離液鹽的存在下,裂解物中的質(zhì)粒DNA與離心柱中的玻璃纖維基質(zhì)結(jié)合。 用乙醇洗滌液洗去污染物,然后純化的質(zhì)粒DNA用低鹽洗脫液或水洗脫。 該步驟不需要DNA酚提取,高拷貝數(shù)質(zhì)粒的典型產(chǎn)量為20-30 µg,低拷貝數(shù)質(zhì)粒的典型產(chǎn)量為3-10 µg。 純化的質(zhì)粒DNA準(zhǔn)備用于限制性酶切,酶連接,PCR或測(cè)序反應(yīng)。 整個(gè)過(guò)程可以在30分鐘內(nèi)完成。
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